荧光染色体原位杂交（Fluorescence In Situ Hybridization, FISH）是一种分子细胞遗传学技术，广泛应用于检测和定位特定DNA序列在染色体上的位置。这项技术通过使用荧光标记的探针与目标DNA序列结合，从而实现对染色体结构异常、基因重排及拷贝数变异的精确分析。以下是FISH检查的基本步骤及其关键要素。
FISH检查方法概述
1. 样本准备
- 采集合适的生物样本（如血液、骨髓或组织活检）。
- 制备细胞悬液或固定细胞涂片。
2. 细胞固定与处理
- 使用适当的固定剂（如甲醇-冰醋酸混合液）固定细胞。
- 进行细胞裂解和脱水处理，确保探针能够有效渗透。
3. 探针设计与制备
- 根据目标DNA序列设计特异性探针。
- 使用荧光标记物（如FITC、Cy3等）对探针进行标记。
4. 杂交反应
- 将标记好的探针与处理后的细胞样本进行杂交。
- 在适宜的温度和时间条件下完成杂交过程。
5. 信号检测与分析
- 使用荧光显微镜观察并记录杂交结果。
- 分析荧光信号的位置和强度，判断是否存在异常。
FISH检查流程表
| 步骤 | 具体操作 | 目的 |
| 1 | 样本采集与制备 | 获取高质量的细胞样本 |
| 2 | 固定与处理 | 确保探针有效渗透 |
| 3 | 探针设计与制备 | 提供特异性检测工具 |
| 4 | 杂交反应 | 实现目标序列的精准定位 |
| 5 | 信号检测与分析 | 确认染色体结构或基因状态 |
通过上述方法，FISH技术能够提供高分辨率的染色体信息，为临床诊断和科研研究提供了重要支持。
